Ефективний і недорогий процес для очищення та ультрафільтрації дріжджів, що експресують рекомбінантні білки

Дріжджова експресія екзогенних генів може не тільки виробляти рекомбінантні білки та пептиди, антитіла та вакцини, цитокіни, фактори росту, гормони та інші біоактивні речовини, але також може бути використана для виробництва промислових ферментів, функціональних харчових продуктів та біологічних матеріалів, що має широкі перспективи застосування .

 

Експресійна система дріжджів включає дві загальновживані системи експресії, тобто систему експресії Saccharomyces cerevisiae і систему експресії метанотрофних дріжджів. Система експресії дріжджів з метанолом є найбільш широко використовуваною системою експресії дріжджів на даний момент, і Pichia є найбільш часто використовуваною, яка може використовувати метанол як вуглець і енергію. Крім того, є дріжджі Хансена, Sphaeroides і так далі.

 

Незалежно від типу системи експресії дріжджів, її подальші процеси розділення та очищення подібні, а специфічний потік процесу бере дріжджову експресію рекомбінантних білків і поліпептидних препаратів як приклад.

 

Мембранні касети мікрофільтрації Guidling використовують відкритий канал потоку та режим фільтрації тангенціального потоку, який може ефективно обробляти складну рідину для живлення, таку як дріжджова ферментаційна рідина та рідина для крекінгу кишкової палички, на високій швидкості, і може забезпечити лінійне посилення від невеликих тестових до виробничих масштабів. Компактна модульна конструкція, просте підключення до трубопроводу, незалежність і читабельність системи можуть захистити операторів і запобігти біологічному забрудненню. І жодних перевірок на обслуговування та очищення. Таким чином, він дуже підходить для етапу очищення ранньої подальшої обробки.

 

Основною метою процесу UF/DF є видалення домішок і витіснення буферів. Ультрафільтраційна мембранна касета Guidling має хорошу однорідність розміру пор мембрани та сильну гідрофільність, що може забезпечити мембрані більший потік і нижчу адсорбцію білка, а також оптимізовану конструкцію каналу потоку з меншим перепадом тиску, легким переміщенням матеріалу та значно скоротити час фільтрації. Крім того, серія продуктів є повною та гнучкою, щоб задовольнити потреби різноманітних застосувань різного масштабу. Тому він дуже підходить для етапу UF/DF подальшої обробки.

 

Нижче наведено приклад застосування мембрани Гідлінгакасетав дріжджах експресія рекомбінантних білків.

 

Мікрофільтраційне освітлення

Ми використовували {{0}}.11 квадратних метрів 0,22 мкм пористої мембранної касети для освітлення 1,5 л дріжджової рідини для бродіння (цільова молекулярна маса білка 42-55 кД) за допомогою мікрофільтрації. У всьому процесі мікрофільтрації досліджували швидкість відновлення цільового білка, зміну каламутності та зменшення потоку через мембрану.

0-17min – процес концентрації, 17-32min – процес промивання та фільтрації. Протягом усього процесу мікрофільтрації TMP поступово збільшувався, швидкість рідини на вході залишалася незмінною, а середній потік матеріалу становив 45LMH.

Каламутність рідини становила 600NTU до мікрофільтрації та 8NTU після мікрофільтрації, і каламутність помітно змінилася.

Результати показали, що вихід цільового білка становив > 90%. Мембранна касета Guidling Technology 0,22 мкм є стабільною та підходить для цього сценарію застосування.

 

Концентрація ультрафільтрації

 

 

Результати показали, що цільовий білок був повністю захоплений. Мембранні касети Guidling Technology 10kd можуть працювати стабільно та підходять для цього сценарію застосування.

Більшість рекомбінантних білків, що експресуються дріжджами, не були сильно експресовані. Каламутність відфільтрованої рідини була, очевидно, знижена, а швидкість відновлення білка була вищою. Оскільки наступний хроматографічний час занадто довгий, це спричинить несприятливий вплив на білок, щоб скоротити хроматографічний час відбору проб, можна додати один етап концентрації ультрафільтрації, і цільовий білок можна сконцентрувати швидко після зразка, що може досягнення мети економії часу, зменшення обсягу наповнювача і, таким чином, зниження собівартості продукції.

 

Мікрофільтраційні мембранні касети Guidling Technology загалом можуть знизити каламутність живильної рідини до рівня менше 20 NTU, повністю задовольняючи потреби подальшої ультрафільтрації та хроматографії. Швидкість відновлення ультрафільтраційних мембранних касет залежить від різних матеріалів, загальна швидкість відновлення може досягати 90-95%.

Компанія Guidling Technology запрошує вас надіслати запит на набори тестів для відповідної оцінки.

 

Про Гідлінга

Guidling Technology — це національне високотехнологічне підприємство, яке спеціалізується на біофармацевтиці, культурі клітин, очищенні та концентрації біомедицини, діагностиці та промислових рідинах. Ми успішно розробили відцентрові фільтрувальні пристрої, ультрафільтраційні та мікрофільтраційні касети, вірусний фільтр, систему TFF, глибинний фільтр, порожнисте волокно тощо, які повністю відповідають сценаріям застосування біофармацевтичних препаратів, культур клітин тощо. Наші мембрани та мембранні фільтри широко використовуються в концентрації, екстракції та розділенні попередньої фільтрації, мікрофільтрації, ультрафільтрації та нанофільтрації. Наші численні лінійки продуктів, від невеликої одноразової лабораторної фільтрації до виробничих систем фільтрації, тестування на стерильність, ферментації, культури клітин тощо, відповідають потребам тестування та виробництва. Guidling Technology з нетерпінням чекає на співпрацю!