Ханчжоу Керівні технології Лтд

Q Сильна аніонна мембранна хроматографія
video
Q Сильна аніонна мембранна хроматографія

Q Сильна аніонна мембранна хроматографія

1. Огляд Іонообмінна хроматографія — це метод очищення, який розділяє біомолекули на основі відмінностей у властивостях їхнього заряду та кількості заряду. Оскільки більшість біологічних макромолекул містять карбоксильні або гідроксильні групи, їхні зарядові характеристики та величину можна регулювати...

Введення продукту

product-800-800
1. Огляд

Іонообмінна хроматографія — це метод очищення, який розділяє біомолекули на основі відмінностей у властивостях їх заряду та кількості заряду. Оскільки більшість біологічних макромолекул містять карбоксильні або гідроксильні групи, їхні зарядові характеристики та величину можна регулювати, контролюючи значення рН буферного розчину. Після того, як біомолекули зв’язуються з протилежно зарядженим аніонним або катіонообмінним середовищем, розділення досягається шляхом зміни іонної сили або рН рухомої фази, в результаті чого спочатку елююються слабко зв’язані молекули, а потім міцно зв’язані молекули.

 

2. Переваги товару

2.1 Швидкий і ефективний - забезпечує високу зв’язувальну здатність при швидкості потоку, яка в 40 разів перевищує швидкість традиційних смол. Порівняно з хроматографією з наповненим шаром, час процесу при мембранній хроматографії скорочується в 30–40 разів. Типова робоча швидкість потоку становить 10 МВ/хв.

2.2 Висока ефективність зв’язування - мембранна хроматографія демонструє високу навантажувальну здатність і високу швидкість потоку за умов низького перепаду тиску, що дозволяє захоплювати заряджені біомолекули за один прохід.

2.3 Масштабована та гнучка - повна серія продуктів мембранної хроматографії може задовольнити різноманітні потреби очищення біомакромолекул, охоплюючи всі етапи від розробки процесу до велико-виробництва. Конструктивна конструкція-типу капсули підтримує як одноразове-використання, так і повторне використання після очищення.

2.4 Підвищення продуктивності - Компактний дизайн мінімізує площу приміщення. Усуваючи операції пакування колонки, очищення, перевірки очищення та зберігання колонки, процес потребує менше буфера для врівноваження та може виконуватися безпосередньо без підготовки колонки. Витрати на оплату праці можна скоротити до 50%.

 

3. Технічний параметр

3.1 Конструкційний матеріал

 

Лабораторний масштаб

малий масштаб

пілотний масштаб

масштаб виробництва

об'єм мембрани

0,2 мл

5мл

140 мл

5L

Опорна структура мембрани:

поліпропілен (PP)

мембранний корпус

поліпропілен (PP)

O кільце

силіконові

 

3.2 Експлуатаційні характеристики

 

Лабораторний масштаб

малий масштаб

пілотний масштаб

масштаб виробництва

об'єм мембрани

0,2 мл

5мл

400 мл

5L

Рекомендована витрата

1-6 мл/хв

25-150 мл/хв

2-12 л/хв

25-150 л/хв

Максимальна робоча температура

35 градусів

Максимальний робочий тиск

3 бар (25 градусів)

Максимальний перепад тиску

3 бар (25 градусів)

Умови зберігання:

20% водний розчин етанолу

 

Термін служби мембранної хроматографії Q можна порівняти з терміном служби хроматографії на агарозному гелі.

product-806-441

product-800-800
product-800-800

 

 

Рисунок 1. Зміни навантажувальної здатності мембранної хроматографії після багаторазового використання, що контролюється BSA

Крім того, ми оцінили ефективність видалення білків і нуклеїнових кислот клітини-господаря мембранною хроматографією. Результати такі.

 

ДНК

HCP

 

Відновлення IgG

Вміст (пг/мг IgG) за допомогою RT PCR

Фактор видалення

Вміст (нг/мг IgG) за Elisa

Фактор видалення

бігти

%

Перед мембраною Q

Після мембрани Q

Журнал

Перед мембраною Q

Після мембрани Q

Журнал

1

96.7

423

1.2

2.55

7

4.8

0.16

2

97.4

438

1.3

2.53

7

4.9

0.15

3

94.7

513

1.3

2.60

6

1.9

0.50

4

95

32

0.9

1.55

6

4.2

0.15

5

96.3

45

1.1

1.61

8

5.2

0.19

6

96.5

158

0.7

2.35

8

6.2

0.11

7

96.4

267

1.9

2.15

9

7.2

0.10

8

96.8

298

2.3

2.11

9

8.2

0.04

9

97.1

746

1.5

2.70

4

2

0.30

10

96.6

39

1

1.59

4

1.5

0.43

Таблиця 1. Швидкість видалення ДНК і білків клітин-господарів у матеріалі IgG з експресією CHO- за допомогою мембранної хроматографії Q

 

Серія експериментів продемонструвала, що мембранна хроматографія Q може ефективно видаляти домішки, зберігаючи при цьому високе цільове відновлення IgG.

Крім того, ми порівняли мембранну хроматографію Gudiling з імпортними марками, і дані про ємність завантаження такі:

Ємність завантаження (мг/мл)

Сарторіус

PALL

Гідлінг

BSA

29

60

45

SOD

25

40

35

Білок А

27

45

40

Трипсин

30

56

44

Таблиця 2. Ефективність навантаження різних білків нашого продукту та продуктів конкурентів

Загальна оцінка показує, що наша вантажопідйомність порівнянна з імпортною продукцією,

product-1119-279

малюнок 2.Використовуючи модуль мембранної хроматографії Q, BSA використовували як стандартний білок для оцінки здатності до зв’язування. Динамічну зв'язуючу здатність порівнювали з імпортною продукцією. Результати показали, що більша частина цільового білка може бути захоплена та елюйована150 мМ NaClпри використанні BSA як модельного білка.

За допомогою різних умов елюції ми виявили, що поведінка елюції мембранної хроматографії подібна до хроматографії на агарозному гелі. Чистота білків, що елююються при різних концентраціях солі, значно відрізняється. При фактичній розробці процесу та виробництві необхідно кількісно визначити оптимальні умови елюювання, щоб отримати цільовий білок високої чистоти.

 

4.Типовий випадок застосування

Видалення ДНК, вірусів, білків клітин-господарів (HCP) і ендотоксинів

Захоплення плазмід, вірусів і білків, а також очищення олігонуклеотидів

 

5. Порядок роботи

5.1: Підготовка та складання обладнання:

5.1.1: Хроматографічна система AKTA: Встановіть модуль мембранної хроматографії подібно до наповнених колонок. Переконайтеся, що напрямок стрілки на модулі відповідає напрямку потоку живлення. Підключіть систему за допомогою з’єднувачів Luer або фітингів Tri-Clamp.

5.1.2 Встановіть швидкість потоку на вході 5–10 МВ/хв і використовуйте буфер рівноваги, щоб видалити повітря із системи. Переконавшись, що у вихідному потоці немає бульбашок повітря, підключіть вихід пермеату до хроматографічної системи.

5.2: Обробка-перед використанням:

5.2.1:

Set the inlet flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with 0.5 M NaOH at >5 МВ, щоб мембрана досягла рівноваги.

5.2.2:

At the same flow rate, perform pre-treatment with 1 M NaCl at >5 МВ, щоб мембрана досягла рівноваги.

5.3 Процес хроматографії

5.3.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with equilibration buffer at >5 МВ, поки мембрана не досягне рівноваги.

5.3.2 Після попереднього -фільтрування зразка через фільтр 0,22 мкм завантажуйте його на колонку, доки не буде нанесено весь зразок або не буде досягнуто ємності зв’язування хроматографії.

5.3.3 Flush with equilibration buffer at >10 МВ, доки УФ-сигнал не впаде до базової лінії.

5.3.4 Виконайте градієнтне або лінійне елюювання відповідно до розробленого протоколу та за потреби зберіть фракції.

5.4 Обробка CIP після -використання – пристрій для мембранної хроматографії CIP

5.4.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and treat with 1 M NaOH at >10 МВ, доки УФ-сигнал не впаде нижче базової лінії.

5.4.2 Після циркуляції протягом 30 хвилин перейдіть на промивання водою, доки рН не досягне 7–8, потім перейдіть на 20% етанол і продовжуйте промивання, доки провідність не стабілізується.

5.5, Зберігання мембранної хроматографії:

Після використання та завершення CIP мембранний модуль можна розібрати та зберігати в 20% етанолі або зберігати при кімнатній температурі в 20% етанолі. Розчин етанолу слід періодично замінювати та перевіряти.

 

6. Інформація про замовлення

Капсульний фільтр із сильною аніонно-обмінною-мембраною для хроматографії

 

Лабораторний масштаб

малий масштаб

пілотний масштаб

масштаб виробництва

Модель продукту

IEXQ0002ES

IEXQ0050ES

IEXQ0400ES

IEXQ5000ES

об'єм мембрани

0,2 мл

5мл

400 мл

5L

Популярні Мітки: q сильна аніонна мембранна хроматографія, Китай, постачальники, виробники, фабрика, оптова торгівля, оптом, в наявності, безкоштовний зразок

Вам також може сподобатися

(0/10)

clearall